石斛属药用植物鉴定研究

石斛是一种常用中药，以新鲜或干燥茎入药。有益胃生津、滋阴清热之功效。不同种类石斛药用成分及含量差异较大．药理活性也不尽相同，历代本草著作中称之为医工难辨之种类。近年来，以石斛为原料开发的保健品日益走俏，对石斛的研究也方兴未艾。但目前市场上流通的商品石斛中，药典收载较少，主流品种大多为非药典收载种；植株在采集后，     

人His6-IFNγ/TNFβ(His6γ-TNFNβ)融合蛋白(包涵体)的分离、纯化与复性研究

应用pET28(含T_7lac启动子和His6-tag)质粒,将人γTNFβ融合基因与之组建成pETγLT表达质粒,并转化于E.coliBL21(DE3).本文对pETγLT/ BL21(DE3)工程菌的His6-γTNFβ重组产物进行了诱导表达,分离纯化的研究.结果表明,该工程菌用LB培养基在37℃扩增至OD_(590)为0.5左右,加IPTG(终浓度为1mmol/L)诱导5小时,此时His6-γTNFβ的表达量可占菌体总蛋白的45%.重组产物绝大多数以IBs形式存在于菌体中.工程菌经反复超声破碎、高速离心,得IBs粗制品后,再经含2mol/L脲的缓冲液洗涤可得到相对纯净的IBs.然后用7mol/L脲变性溶解IBs,离心取上清,进行Ni~(2 )-Sepharose 6B柱一步法亲和层析,可得到电泳纯度为95%的His6-γTNFβ,经稀释复性和用凝血酶切去His6-tag的产物,其细胞毒活性为(1.2～2.0)×10~7U/mgp,抗病毒活性为(6.0～6.6)×10~6U/map.     

ISSR-PCR在石斛种间鉴别中的应用

目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位点最少7个,最多14个,扩增片段大小为220-1260 bp。其中,引物UBC-807和UBC-864具有较高的多态性条带比率,均可以独立将所有被测种区分开来。结论ISSR-PCR作为一种简便、可靠的分子标记鉴定技术,可以作为石斛属种间鉴别的方法之一。     

中药对间质干细胞分化为神经细胞的影响

中药成分促进间质干细胞分化为神经细胞的研究是目前中医药和生物医学领域的热点之一。中药对间质干细胞的作用可以概括为促进间质干细胞的生长、增殖、分化,改变其分泌状态及其保护分化后的神经细胞等多个环节。从细胞培养、细胞分化、作用机制以及治疗作用等方面,分类综述了三七、黄芪、麝香、绞股蓝、川芎、丹参对间质干细胞分化为神经细胞的影响,并简述了问题和展望。     

人胚胎干细胞建系及培养的研究进展

人胚胎干细胞的培养是了解人胚胎发育机制和实现治疗性克隆的前提。在人胚胎干细胞建系和维持过程中，胚胎材料来源、内细胞团分离、扩增传代、冻存复苏等均为难点。从鼠源饲养层、人源饲养层到无饲养层培养系统的发展，以及体细胞核移植技术平台的建立，奠定了治疗性克隆的基础。     

药物基因组学研究进展

同一种药物对患有相同疾病的不同患者疗效不同是临床上常见的一种现象 ,以往的观点认为这是由于药代动力学的差异造成的。最近的研究表明 ,药效学原因所产生的差异更为广泛和显著 ,而药效学差异大多源于基因的差异。为此 ,提出了“药物基因组学”这个全新的概念。1　药物遗传学与药物基因组学药物遗传学 (ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｅｔｉｃｓ)的概念是 2 0世纪5 0年代由ＦｒｉｅｄｒｉｃｈＶｏｇｅｌ[1] 首先提出的 ,它研究包括药物在内的外界化学物质 (尤其是有毒外源物质 )引起机体反应 (主要指毒性和不良反应 )的遗传多样性。在ＲＦＬＰ和…     

姜百胃炎片对大鼠乙醇胃黏膜损伤模型的影响

目的:研究由高良姜、香附、百合和乌药提取物制成的复方中药姜百胃炎片,对大鼠乙醇胃黏膜损伤模型的胃黏膜保护作用.方法:采用无水乙醇灌胃法建立大鼠乙醇胃粘膜损伤模型,以溃疡指数表示大鼠胃黏膜损伤程度,比较姜百胃炎片给药组和模型组的差别.结果:模型组、姜百胃炎片中剂量组(1.08 9·kg -1·d-1)和姜百胃炎片高剂量组(2.16 9·kg-1·d-1)的溃疡指数分别为141.58±47.43、24.83±23.04和2.12±2.58,姜百胃炎片可以显著降低大鼠乙醇胃黏膜损伤模型的溃疡指数(P＜0.01).结论:姜百胃炎片对大鼠乙醇胃黏膜损伤模型的胃黏膜具有保护作用,该作用可能与其具有抗氧化能力,以及增强组织自身生长和修复能力等有关.     

ISSR-PCR在石斛种间鉴别中的应用

目的 采用ISSR-PCR方法对石斛属9种植物进行鉴别,探讨不同种石斛在DNA分子水平上的差异。方法 选取10条由SSR组成的引物,对9种石斛进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析。结果 10条引物中有7条扩增出多态性条带。每条引物可检测的多态性位点最少7个,最多14个,扩增片段大小为220-1260 bp。其中,引物UBC-807和UBC-864具有较高的多态性条带比率,均可以独立将所有被测种区分开来。结论ISSR-PCR作为一种简便、可靠的分子标记鉴定技术,可以作为石斛属种间鉴别的方法之一。     

铁皮石斛多糖对小鼠胚胎干细胞生长的影响

目的研究铁皮石斛多糖对小鼠胚胎干细胞生长的影响。方法采用水提醇沉法对铁皮石斛进行初步提取,体外培养小鼠胚胎干细胞,通过克隆形成率试验、MTT试验及实时定量PCR的方法研究铁皮石斛提取多糖对小鼠胚胎干细胞的增殖及多能性维持的作用。结果铁皮石斛多糖处理组细胞(50~200μg/m L)的克隆形成率、MTT吸光度值均高于空白对照组,同时其干性相关基因的表达量与对照组相比无显著差异。结论铁皮石斛多糖可以显著促进小鼠胚胎干细胞的增殖、提高其克隆形成率,同时又不影响其多潜能性的维持。     

缺氧诱导因子-1与肿瘤

缺氧诱导因子－1（hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是调控细胞氧平衡和诱导缺氧反应基因表达的重要的DNA结合蛋白，与肿瘤的发生、发展密切相关。HIF－1受多种抑癌基因、癌基因、生长因子的调节，参与对肿瘤生理过程的调控。了解HIF－1的作用机制，人工调控肿瘤细胞内的HIF－1水平有助于对肿瘤的治疗。